منتدي الاطباء البيطريين
اهلاً و سهلاً بجميع الزائرين و الاعضاء من الاطباء البيطريين و كل الراغبين في الاشترلك في المنتدي *** نرحب بجميع الاعضاء و الزائريين من مصر و من جميع الدول العربية و يجب التسجيل بالمنتدي كي تظهر جميع اقسام المنتدي >>>>
Choose your Language
English= الانجليزية
French=  الفرنسية
 البوابة
 الرئيسية
 قائمة الاعضاء
 البيانات الشخصية
 س .و .ج
 بحـث
المتواجدون الآن ؟
ككل هناك 5 عُضو متصل حالياً :: 0 عضو مُسجل, 0 عُضو مُختفي و 5 زائر :: 1 روبوت الفهرسة في محركات البحث

لا أحد

أكبر عدد للأعضاء المتواجدين في هذا المنتدى في نفس الوقت كان 177 بتاريخ الخميس أبريل 18, 2013 8:58 pm
لمن يريد الدعاية و الاعلان في هذا المنتدي

الجمعة أكتوبر 22, 2010 3:02 pm من طرف Admin

لمن يريد الدعاية و الاعلان في هذا المنتدي عليه الاتصال بالدكتور علاء عكاشة

ت
01227968156
lol!


شركات الادوية - المشاريع الخاصة البيطرية - العيادات البيطرية - معامل …


تعاليق: 2

المواضيع الأخيرة
» اطباء الارشاد جنود اوفياء لمهنتهم و لمصرنا الحبيبة
الخميس أكتوبر 06, 2016 6:08 pm من طرف د سناء

» وحدات سكنية بمشروع دار مصر للاطباء البيطريين
السبت أكتوبر 01, 2016 7:04 pm من طرف د سناء

» للنهوض بالثروة الحيوانية في مصر لابد أن : -
السبت أكتوبر 01, 2016 4:22 pm من طرف د علاء عكاشة

»  د عزة الحداد و شرح الذبح الآمن و طريقة حماية انفسنا من مرض انفلونزا الطيور
الخميس سبتمبر 29, 2016 3:30 pm من طرف هويدا

» بعض مقالات د علاء عكاشة عن الارشاد البيطري و موضوعات اخري
الإثنين سبتمبر 26, 2016 10:01 pm من طرف د رضا

» كيفية كتابة التقرير الطبي الشرعي + نموذج تقرير
السبت سبتمبر 10, 2016 7:43 pm من طرف د رضا

» الإرشاد البيطري و دورة في خدمة العمل البيطري و خدمة المجتمع
الأحد أغسطس 28, 2016 11:18 pm من طرف Admin

» كيف تقرأ لغة الجسد؟ 15 حقيقة يجب ان تعرفها عن قراءة لغة الجسد
الثلاثاء أغسطس 16, 2016 9:07 pm من طرف د رضا

» قوائم بأهم الأمراض الحيوانية في الممكلة العربية السعودية
الأربعاء أغسطس 10, 2016 11:40 pm من طرف د رضا

مواضيعي
زائر لوحة التحكم زائر 55
دخول

لقد نسيت كلمة السر

بحـث
 
 

نتائج البحث
 

 


Rechercher بحث متقدم

عدد الزائرين و اعلام بلادهم
https://www.facebook.com/vetext1/

D.Alla Okasha

تقنية PCR

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي اذهب الى الأسفل

مشكوووووووووووور تقنية PCR

مُساهمة من طرف mira.kareem في الأحد يناير 16, 2011 2:22 pm



تقنية

PCR




Polymerase
Chain Reaction




تفاعل
البليمريز التتابعي






تحفظ المعلومات الوراثية و انتاج المواد لصنع الخلايا و الحفاظ عليها في
داخل الحمض النووي (DNA ) . و تقوم الخلية بمضاعفة كمية الحمض النووي
وقت انقسام الخلية
بشكل تلقائي و بشكل سريع مع وجود نظام تصحيح للأخطاء خلال النسخ. . و
تبلغ سرعة النسخ والمضاعفة إلى 1000 قاعدة نيتروجينية بالثانية ( داخل
النظام الحيوي ) و هي كما ذكرنا تحدث في الخلية في وقت التكاثر والانقسام
فقط .



ومع
التطور في مجال التكنولوجيا الحيوية والذي يقوم على التعامل مع الحمض
النووي (DNA
) بشكل أساسي ، استدعى ذلك العلماء على أن يبحثوا عن طريقة أو تقنية
تقوم على مضاعفة كمية الحمض النووي (DNA ) بشكل كبير ، فكان هناك عدة
محاولات لتنشيط الخلية على الانقسام المستمر بإضافة عوامل النمو growth
factors ، ولكن هذه الطريقة لم تكن ذات جده لدى العلماء لأسبا
ب
كثيرة. إلى أن توصل العالم د. كري مولس Dr. Kerry Mullis في عام 1985 ( و
قد حصل على جائزة نوبل في الكيمياء عام 1993)بنشر اختراعه لتقنية البي سي
ار PCR فكانت هذه التقنية بوابة لكثير من التطورات المتسارعة في مجال
التكنولوجيا الحيوية ، من أهم الأسباب التي ساعدت هذه التقنية
على الانتشار عدم اعتمادها على النظام الحيوي(أي الخلية) و التحكم بكمية
الحمض النووي (DNA ) و وسرعة في الإنتاج ولكن كان من عيوب هذه التقنية عدم
وجود نظام إصلاح أخطاء الارتباط الخاطئ miss match .




ما
هو


PCR :




هو تقنية مخبريه تم اكتشافها عام 1983م تقريباً تقوم على إكثار نسخ الحمض
النووي (DNA
) خارج النظام الحيوي . أي أنها طريقة لنسخ الحمض النووي في المختبر. و
لذلك فهي تقنية حيوية لاستنساخ
قطعة من محددة من الحمض النووي و مضاعفة إنتاجها لكي
يتسنى إجرى عليه اختبارات و فحوصات إضافية.




ما
هي متطلباتPCR :




لتقوم بإنتاج الحمض النووي (DNA
) بواسطة PCR يتتطلب عليك توفير :




1.
جهاز للتحكم بدرجات حرارة التفاعل بشمل دقيق و متتالي ( الدورة الحرارية
Thermocycle ) : ويقوم هذا الجهاز بتغير درجة الحرارة بشكل سريع ، لآن
تغير درجة الحرارة هو الأساس الذي تقوم عليه فكرة هذه التقنية .





2.
البليمريز : وهو الإنزيم الذي يقوم ببناء وترتيب القواعد النيتروجينية (
حدات الحمض النووي (DNA ) ) ، ويجب أن ي
كون
هذا الإنزيم مقاوم للحرارة العالية ليتمكن من العمل . و قد اكتشف انزيم
مقاوم للحرارة و اسم تاج Tag




3.
مجموعة متفرقة من القواعد النيتروجينية: ( A T C G ) ليتمكن الإنزيم من
ترتيبها في مواقعها أثناء عملية نسخ الحمض النووي (DNA ) .





4.
بريمر Primer : وهو قطعة صغيرة من الحمض النووي (DNA ) ليتمكن الإنزيم من
بداء البناء و النسخ عليها .


5.
والشيء الأهم هو وجود نسخة من الحمض النووي (DNA ) المراد نسخه .





6.
بالإضافة إلى محلول أو وسط ليتم به التفاعل : وهذا المحلول يختلف بين تفاعل
و أخر .




عملية
النسخ :




بعد وضع الحمض النووي المراد نسخة مع البريمر و و إنزيم البوليمريز و
مجموعة مع الأحماض النووية في أنبوب داخل جهاز التحكم الحراري فان هناك 3
مراحل منفصلة تمر بها عملية النسخ:




1.
مرحلة التفكيك


Denature


: رفع الحرارة إلى 94 ْم وذلك لفك الحمض النووي (DNA ) الأصل
.




2.
مرحلة الالتصاق


anneal


: إنزال الحرارة إلى ما بين 55-60 ْم ليقوم البريمر بالألتزاق فيزيائياً
بواسطة الروابط الهيدروجينية مع الحمض النووي (DNA ) الأصل .




3.
مرحلة الامتداد


extend

: ثم يقوم برفع درجة الحرارة إلى 75 ْم ليقوم البلمريز بعمله في
بناء الحمض النووي (DNA ) الجديد .




وهذه المراحل الثلاث تعتبر دورة كاملة وفيها يصبح الحمض النووي (DNA
) الأصل قد تضاعف ، وتعتمد كمية ناتج الحمض النووي (DNA ) على عدد الدورات
( والصورة التالية توضح العملية ) .



لمشاهدة هذه العملية اضغط على
هنا.



تطبيقات
PCR :




لتقنية
PCR تطبيقات كثيرة في مجال أبحاث الحمض النووي (DNA ) و الوراثة ومنها :




1.
الكشف عن الطفرات الوراثية : وذلك عن طريق وضع بريمر خاص للطفرة لتكثير
الجين الخاص بها . ومنه نقوم بمعرفة المرض إذا كان على زوجين الكروموسومات
أو على احدهما ( allele ) .


2.
تعين البصمة الوراثية .




3.
الكشف عن الفيروسات : وهذه الطريق هي الأدق في تحديد نوع وجنس الفيروس
وكميته.




4
.
هو العنصر الأهم في عملية التجميع الجيني ( Recombinant الحمض النووي (DNA
) ) : حيث نقوم بتكثير الجين المراد إدخاله على البلازمد أو الحمض النووي
(DNA ) المضيف .




5.
استخدامه في تغير نهايات الجين لتصبح متوافقة مع إنزيمات القطع (
Restriction enzyme ) .




6.
هو العملية الأساس في تحديد تتابع القواعد النيتروجينية في الحمض النووي
(DNA ) ( الحمض النووي (DNA ) Sequencer ) .




7.
معرفة طول الحمض النووي (DNA ) .




8.
تقنية الحمض النووي (DNA ) المكمل ( cالحمض النووي (DNA ) ) .





9.
تحديد الجين المطلوب من خليط من الجينات .




10.
يستخدم في تقنية (microarrays ).




11.
في مشروع الخارطة الجينية البشرية (human genome project ) .





12.
الساوثرين
بلوت (southern plot ) .




13.
تقنية ارتباط الحمض النووي (DNA ) – بروتين ( الحمض النووي (DNA )
-Protein Interaction ) .




14.
في مجال الطب الشرعي ( اختبار الأمومة ، حالات الاغتصاب ، تحديد الهوية ...
الخ ) .




وغيرها من التطبيقات المخبرية والبحثية .




أنواع
PCR :

هناك نوعان
من
PCR :





1. PCR
العادي : وهو ما تم شرحه والتطرق اليه في الخطوات السابقة .





2.
rtPCR : وهو اختصار لـ ( Real Time PCR ) : وهذا النوع يقوم على نفس المبدأ
ولكن الخلاف الوحيد يكون مربتط الجهاز بكمبيوتر لتحديد الوقت الحقيقي لبدا
التفاعل ومن ثم الكمية الحقيقية لعدد نسخ الحمض النووي (DNA ) ويعتمد ذلك
على وجود قواعد نيتروجينية حرة مشعة لتحديد ذلك . مما يسهل على الباحثين
الوقت لتحدد وجود الجين المطلوب أو لا ، وكمية الجين بدون الوصول إلى نهاية
الدورات الحرارية المحددة .




لسماع تسجيل فديو
لتسمية البي سي ار بهذا الاسم.
اضغط هنا

mira.kareem
عضو سوبر
عضو سوبر

عدد المساهمات : 1330
تاريخ التسجيل : 24/10/2010
العمر : 32
الموقع : www.facebook.com

الرجوع الى أعلى الصفحة اذهب الى الأسفل

استعرض الموضوع السابق استعرض الموضوع التالي الرجوع الى أعلى الصفحة


 
صلاحيات هذا المنتدى:
لاتستطيع الرد على المواضيع في هذا المنتدى